九月五日。

武田家開始從各路向伊賀國發動進攻。

伊勢地口，由武田信繁掛帥，率領直屬軍團兩萬軍勢，柘植口，由武田信廉，望月信永等近畿四國大將，兩萬軍勢，玉滝口由望月信永，大熊朝秀，高坂昌信，的兩萬軍勢，笠間口由德川家康，佐竹義重率領的外樣軍團兩萬軍勢出陣。

初瀨口則由原昌胤，馬場昌房，保科正直兩萬軍勢進入，多羅尾口，則由其餘眾大名聯軍併入攻伐。

至於京極高吉，細川藤孝等大將則繼續包圍甲賀。

武田信繁下令，大軍所經之處，寸草不生，人畜不留。

為對抗武田家的大軍拉網合圍，伊賀三上忍中的藤林長門守，百地丹波，柏原城主龍野吉政，將伊賀全民皆兵，一同對抗武田家的襲擊。

伊賀忍者以及所有物村百姓，以伏擊，夜襲，下毒等手段對抗入侵大軍。

這樣全民皆兵的戰法，一時之間令武田各軍勢傷亡不小，而武田軍亦是放開了手段，堅決執行武田信繁的命令，一草一木不留。

柘植口的，由武田信廉，望月信永率領的主力，經過多日激戰之後，攻克了比自山城。

其餘各部亦是一路燒殺，攻至了柏原城城下。

柏原城中匯聚了從各地逃亡來的伊賀忍者，百姓五千多人。

在城主龍野吉政的帶領下，與城外五六萬武田家，展開激戰。

武田軍白天攻城，忍者是夜間襲擊，激戰持續了五日，武田軍多部被忍者襲擊，而潰敗。

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